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【佑安學(xué)術(shù)】獨(dú)具特色,,北京佑安醫(yī)院任鋒團(tuán)隊(duì)多項(xiàng)CRISPR研究結(jié)果在國(guó)內(nèi)學(xué)術(shù)會(huì)議匯報(bào)和交流

作者:肝病研究所 張向穎 瀏覽次數(shù):
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成簇規(guī)律間隔短回文重復(fù)序列(CRISPR)/CRISPR相關(guān)系統(tǒng)(Cas)作為一種新型的核酸檢測(cè)技術(shù),因其具有高靈敏度和高特異性的獨(dú)特特性,,在過(guò)去的十年中受到了廣泛關(guān)注并取得了很大進(jìn)展,。任鋒教授科研團(tuán)隊(duì)近年來(lái)利用CRISPR新技術(shù)致力于傳染病相關(guān)病原體核酸檢測(cè)新方法的建立與臨床應(yīng)用,研究成果相繼在國(guó)內(nèi)學(xué)術(shù)會(huì)議中進(jìn)行匯報(bào)和交流,。

任鋒教授2021級(jí)博士研究生田原,,在2023年4月成都舉辦的“第三屆中華分子診斷大會(huì)”優(yōu)秀論文評(píng)選中榮獲“三等獎(jiǎng)”,論文的題目是“基于PCR-CRISPR/Cas13a技術(shù)檢測(cè)乙型肝炎病毒共價(jià)閉合環(huán)狀DNA方法的建立和臨床驗(yàn)證”,。研究通過(guò)選定HBV cccDNA跨缺口區(qū)作為擴(kuò)增靶序列,,設(shè)計(jì)特異性PCR引物、熒光定量PCR探針以及crRNA,,建立了基于CRISPR-Cas13a技術(shù)的HBV cccDNA檢測(cè)新方法,。本研究使用qPCR、PCR-CRISPR,、RCA-qPCR,、RCA-PCR-CRISPR和ddPCR五種方法對(duì)40例HBV相關(guān)病人的肝組織和24例HBV相關(guān)病人的血漿、全血和PBMC進(jìn)行了檢測(cè),。結(jié)果表明,,RCA-PCR-CRISPR方法對(duì)肝組織的檢出率為72.5%,高于其他檢測(cè)方法,。本研究建立了基于CRISPR/Cas13a的新型檢測(cè)方法,,可對(duì)HBV cccDNA進(jìn)行高靈敏度和特異性檢測(cè),為準(zhǔn)確檢測(cè)HBV感染,、抗病毒治療評(píng)估,、治療終點(diǎn)的確定以及調(diào)整治療方案提供了有力的技術(shù)支撐。


任鋒教授2022級(jí)博士研究生范子豪,,在2023年3月重慶舉辦的“第四屆全國(guó)臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)和醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)研究生學(xué)術(shù)論壇”優(yōu)秀論文評(píng)選中榮獲“二等獎(jiǎng)”,,論文的題目是“CRISPR/Cas13a技術(shù)助力乙型肝炎低病毒血癥患者HBV DNA快速便捷檢測(cè)”。該研究利用CRISPR/Cas13a檢測(cè)新技術(shù),,聯(lián)合等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(RAA),,建立了基于RAA-CRISPR/ Cas13a的HBV DNA快速、便攜檢測(cè)試紙條,。這種快速便攜的HBV DNA檢測(cè)試紙條將有望迅速擴(kuò)大HBV感染的診斷篩查能力和覆蓋面積,,為HBV感染者特別是HBV低病毒血癥患者(LLV)的HBV DNA檢測(cè)提供了一種可視化的、快速檢測(cè)的替代方案,。這將簡(jiǎn)化HBV感染患者抗病毒治療效果的驗(yàn)證過(guò)程,,有助于解決HBV感染這一全球公共衛(wèi)生問(wèn)題。


任鋒教授2020級(jí)碩士研究生曹亞玲,于2023年6月在青島參加了由中華醫(yī)學(xué)會(huì),、中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)主辦的“第六次全國(guó)肝病相關(guān)感染學(xué)術(shù)會(huì)議”,,并在大會(huì)中匯報(bào)“基于CRISPR/Cas13a技術(shù)的耐碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌快速檢測(cè)新方法的建立及評(píng)價(jià)”相關(guān)研究。該研究利用CRISPR/Cas13a檢測(cè)新技術(shù),,聯(lián)合聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR),、等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(RAA),建立了基于PCR/RAA-CRISPR/ Cas13a檢測(cè)耐碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌(CRKP)的方法,。通過(guò)結(jié)合橫向側(cè)流試紙條技術(shù)實(shí)現(xiàn)結(jié)果的可視化,。該方法使用PCR/RAA-CRISPR檢測(cè)51株臨床樣本,CRKP檢出率可達(dá)到92.16%,,這有助于在小型實(shí)驗(yàn)室開(kāi)展CRKP的檢測(cè)工作,,在耐藥監(jiān)測(cè)、感染控制以及臨床治療指導(dǎo)方面有廣泛的應(yīng)用前景,。

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CRISPR新技術(shù)被《Nature》認(rèn)為是2022年7大“顛覆性”技術(shù)之一,。基于CRISPR技術(shù)可實(shí)現(xiàn)快速,、精確,、便攜式的核酸診斷,其有望成為下一代核酸檢測(cè)新技術(shù),,尤其是在感染性疾病的診斷上有著極佳的發(fā)展前景,。隨著國(guó)內(nèi)外CRISPR/Cas相關(guān)分子診斷技術(shù)不斷發(fā)展和優(yōu)化,其應(yīng)用場(chǎng)景將被不斷拓展,,有望成為新一代通用型,、平臺(tái)型的分子診斷技術(shù)。