近日,，北京佑安醫(yī)院院長,，北京市肝病研究所長李寧，研究員張愛英,，受邀參加了2018年8月18日至19日在意大利佛羅倫薩舉行的GAC-2018學(xué)術(shù)會議,，世界知名專家學(xué)者和代表共同聚焦醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的基礎(chǔ)研究，臨床管理,，重大疾病,，過敏因素等各大學(xué)科的前沿研究，提供了一個交流最新研究成果和先進(jìn)研究方法的平臺,，旨在整合資源,，促進(jìn)國際合作。來自美國,，英國,，俄羅斯，日本,，以色列,，哥倫比亞，中國以及臺灣地區(qū)等世界各地的杰出學(xué)者與專家共同參與了此次盛會,，交流領(lǐng)域內(nèi)的新成果,。張愛英研究員在大會上向國際同行做了題為“Study on Protein Microarray Diagnosis to Hepatocellular Carcinoma”的英文報告，受到國內(nèi)外專家的一致好評,。

       張愛英研究員匯報的研究成果,，專注于與肝癌診斷相關(guān)中的蛋白芯片技術(shù)研究，利用蛋白芯片技術(shù)檢測肝癌相關(guān)血清蛋白標(biāo)志物,，以達(dá)到提高肝癌診斷的目的,。該技術(shù)在北京佑安醫(yī)院院長李寧教授的指導(dǎo)下,，經(jīng)過6年的實(shí)驗(yàn)室反復(fù)實(shí)驗(yàn)完成，發(fā)表文章20余篇,，申請國際專利26項(xiàng),。獲得了中國，日本,，加拿大,，澳大利亞，德國等多個國家的國際發(fā)明專利證書11項(xiàng),，具有國際國內(nèi)領(lǐng)先水平,。該芯片技術(shù)研究的系列成果也曾經(jīng)在2018年4月23日～25日，在中國桂林召開的第7屆春季國際工程與技術(shù)大會上做英文演講報告（ID:SCET2018_10100）,，與國際同行進(jìn)行技術(shù)交流討論,。

特邀嘉賓和與會代表合影留念

       目前，人類對腫瘤的認(rèn)識水平和采用的常規(guī)治療手段尚不能有效地治療肝癌,，因此,，闡明肝癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵機(jī)制，建立肝癌預(yù)測預(yù)警和早期診斷技術(shù)方法,，建立特異的靶向治療和個體化治療措施,，對于臨床上有效治療肝癌、降低肝癌的死亡率,、提高生存率和患者的生存質(zhì)量有著十分重要的意義,。肝癌的早期診斷與肝癌的治療及預(yù)后密切相關(guān)，肝癌相關(guān)血清蛋白腫瘤標(biāo)志物可以客觀地,、特異性地反映肝癌的發(fā)生和發(fā)展進(jìn)程,，其精準(zhǔn)和高靈敏的定量檢測對于臨床診斷、治療過程和預(yù)后評價具有重要意義,。

       血清標(biāo)志物檢測是目前能夠進(jìn)行肝癌早期診斷的可行性方法,，然而，現(xiàn)有肝癌血清學(xué)診斷標(biāo)志物在極早期肝癌患者診斷和預(yù)警方面的特異性,、敏感性仍然存在不足,，患者早期漏診率較高。針對肝癌診斷過程中,，樣品復(fù)雜,、單一標(biāo)志物可信度差、特異性標(biāo)志物匱乏,、豐度低等問題,，李寧教授團(tuán)隊(duì)開發(fā)的蛋白芯片檢測方法研究，揭示了血清蛋白標(biāo)志物在肝癌發(fā)生發(fā)展進(jìn)程中的分子機(jī)制,，實(shí)現(xiàn)了肝癌的精準(zhǔn)診斷,，提高肝癌的早期診斷,，促進(jìn)生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域的發(fā)展。

       首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京佑安醫(yī)院,，北京市肝病研究所于2012年成立了生物芯片實(shí)驗(yàn)室，目前已經(jīng)成功研發(fā)了單標(biāo)志物蛋白芯片和多標(biāo)志物蛋白芯片,，多標(biāo)志物芯片可用來檢測甲胎蛋白（AFP),、甲胎蛋白異質(zhì)體（AFP-L3)、磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3),、高爾基體糖蛋白73(GP73)和異常脫羧凝血酶原（DCP）等5項(xiàng)肝癌相關(guān)血清標(biāo)志物,。蛋白芯片用于檢測血清中的腫瘤標(biāo)志物，其敏感性與特異性與傳統(tǒng)的ELISA方法相比較,，沒有統(tǒng)計學(xué)差異,；在樣本量，時間和成本上,，蛋白芯片有明顯的優(yōu)勢,。完成一項(xiàng)標(biāo)志物檢測， ELISA 方法大約需要150元人民幣,，檢測時間3個小時,，需要樣本量50微升。蛋白芯片方法具有多同量的有點(diǎn),，可以一次性完成多項(xiàng)標(biāo)志物檢測,，目前研發(fā)的肝癌血清標(biāo)志物蛋白芯片，一次完成5項(xiàng)標(biāo)志物檢測,，需要50元人民幣,，檢測時間1.5個小時，需要樣本量15微升,?？焖伲?jīng)濟(jì),，微量樣本量的芯片技術(shù),，有利于對肝癌高危患者進(jìn)行大規(guī)模篩查,。

北京佑安醫(yī)院,，北京市肝病研究所研發(fā)的肝癌相關(guān)標(biāo)志物蛋白芯片

       肝癌血清樣本資源庫是進(jìn)行肝癌血清學(xué)診斷標(biāo)志物研究的關(guān)鍵。為了盡快實(shí)現(xiàn)肝癌的極早期防控,、尋找肝癌極早期防控和動態(tài)檢測的標(biāo)志物,，提高肝癌的精準(zhǔn)診斷，李寧教授于2006年發(fā)起成立了《北京市乙型肝炎大數(shù)據(jù)樣本資源庫》?，F(xiàn)有-80℃冰箱70臺,，大型液氮罐7套,，現(xiàn)有標(biāo)本（包括血清、血漿,、 PBMCs,、DNA、RNA）HBV標(biāo)本40萬余份,；HCC標(biāo)本10萬余份,。總體樣本數(shù)超過50萬份,，并附有全部臨床信息,。并建立了慢乙肝-肝硬化-肝癌全病程動態(tài)隨訪隊(duì)列。慢乙肝1000余例,；肝纖維化,、肝硬化1000余例；肝癌800余例,。動態(tài)隨  訪隊(duì)列共3000余例,，所有患者每3個月隨訪一次，包括臨床癥候?qū)W,、檢驗(yàn)學(xué),、影像學(xué)和病理學(xué)資料，預(yù)留外周血標(biāo)本,。前期工作完成了2000人份的檢測,， 獲得了5項(xiàng)標(biāo)志物在肝癌各個臨床分期的變化規(guī)律，采用Fisher判別方法方法,，對5項(xiàng)標(biāo)志物在肝癌各個臨床分期的表達(dá)數(shù)值,，進(jìn)行分析，建立了肝癌精準(zhǔn)診斷數(shù)學(xué)模型,，肝癌/正常人對比確診率達(dá)95.2%,；早期肝癌/肝硬化對比診斷符合率達(dá)71.6%。

       在這次大會匯報中,，張愛英研究員重點(diǎn)匯報了AFP-L3蛋白芯片的研發(fā)過程,。AFP-L3是AFP的異質(zhì)體，根據(jù)與小扁豆凝集素( LCA)親合強(qiáng)弱程度不同,，將 AFP分為AFP-L1,、AFP-L2、AFP-L3,。近年來研究發(fā)現(xiàn)AFP-L3在肝癌的早期診斷,、鑒別診斷、療效評估和預(yù)后監(jiān)測等方面均比AFP檢測更具優(yōu)勢。在2005年被美國食品及藥物管理局(FDA)采納作為肝癌患者的診斷和預(yù)后指標(biāo),。目前血清糖蛋白AFPL3的檢測方法原理,，是根據(jù)糖蛋白與凝集素的親和程度進(jìn)行分離或者糖蛋白富集，然后用免疫學(xué)方法進(jìn)行定量檢測,，或者使用抗體直接進(jìn)行免疫學(xué)檢測檢測方法技術(shù)要求高,、操作繁瑣、試劑昂貴,，限制了其在臨床的應(yīng)用,。研究團(tuán)隊(duì)經(jīng)過反復(fù)摸索實(shí)踐，利用傳統(tǒng)糖蛋白檢測方法的原理,，成功簡單、快速的蛋白芯片檢測AFPL3方法,，該技術(shù)已經(jīng)成功獲得了多項(xiàng)國際專利,。該方法能夠定性、定量檢測樣本中的AFPL3,，方法簡便,，操作簡單，成本低廉,，將為肝癌高危人群大規(guī)模篩查提供了經(jīng)濟(jì),、可靠的檢測方法，并將提高肝癌的診斷準(zhǔn)確率,，進(jìn)一步為提高肝癌治愈率和長期生存率做出重大貢獻(xiàn),。

       張愛英向國際同行匯報的肝癌相關(guān)標(biāo)志物蛋白芯片檢測技術(shù)，具有簡單,、快速,、便捷、經(jīng)濟(jì),、高通量的優(yōu)點(diǎn),，屬于簡單、快速便于普及的快速診斷技術(shù),，該技術(shù)應(yīng)用于大規(guī)模肝癌篩查中,，患者既可避免活檢創(chuàng)傷和放射性輻射，同時能夠節(jié)約大量寶貴的醫(yī)療資源,。全世界每年的新發(fā)肝癌病人數(shù)高達(dá) 70 萬例左右,，而我國將近占了一半左右的比例。該項(xiàng)目的實(shí)施,，可帶來可觀的經(jīng)濟(jì)效益,，具有重要的社會和經(jīng)濟(jì)學(xué)意義。

國內(nèi)和國際專利證書